[发明专利]一种革兰氏阳性细菌基因组DNA的快速提取方法在审
| 申请号： | 201910964837.0 | 申请日： | 2019-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN110643601A | 公开（公告）日： | 2020-01-03 |
| 发明（设计）人： | 陈德坤;程红玉;管雄;马文涛 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 11385 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 | 代理人： | 韩晶 |
| 地址： | 712100 陕西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开了一种革兰氏阳性细菌基因组DNA的快速提取方法，包括以下步骤：G+细菌通过离心方法收集，采用9000r/min 2min；G+细菌细胞壁的破碎方法为使用裂解buffer‑TENT buffer，然后100℃煮沸三分钟，3000g离心5min，收集上清；G+细菌基因组的沉淀，G+细菌基因组的收集方法为上清中加入75％乙醇，上下颠倒混匀，12000g离心5min；重复2‑3次，收集沉淀，加入无菌ddH | ||
| 搜索关键词： | 细菌基因组 沉淀 革兰氏阳性细菌 细菌细胞壁 基因组DNA 蛋白污染 技术操作 快速提取 煮沸 乙醇 混匀 裂解 省时 无菌 备用 颠倒 破碎 溶解 细菌 节约 引入 重复 | ||
【主权项】：
1.一种革兰氏阳性细菌基因组DNA的快速提取方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)G+细菌通过离心方法收集，采用9000r/min 2min；/n2)G+细菌细胞壁的破碎方法为使用裂解buffer-TENT buffer：10mM Tris-HCl，0.1MNaCl，1mM EDTA，5％[v/v]Triton X100，pH 8.0，然后100℃煮沸3-5分钟，3000g离心5min，收集上清；/n3)G+细菌基因组的沉淀方法为95％乙醇加入上清中，-20℃放置20分钟后，在1000g-14000g范围内离心10min，收集上清；G+细菌基因组的收集方法为上清中加入质量百分浓度为70％-90％乙醇，上下颠倒混匀，12000g离心5min；重复2-3次，收集沉淀，加入无菌ddH
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