[发明专利]一种细点圆趾蟹下脚料抗菌肽的制备方法有效
| 申请号： | 201910973836.2 | 申请日： | 2019-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN110714045B | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 余辉;庄黛娜;陈小娥;方旭波;陈洁 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/20;C07K1/16 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 尉伟敏 |
| 地址： | 316022 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明属于抗菌肽技术领域。本发明公开了一种细点圆趾蟹下脚料抗菌肽的制备方法，其包括前处理、酶解、酶解后处理和提纯等步骤，其中提纯步骤中依次采用C18固相萃取柱、葡聚糖凝胶柱和半制HPLC色谱柱对细点圆趾蟹下脚料酶解产物中抗菌肽进行分离提纯，制得细点圆趾蟹下脚料抗菌肽。本发明中细点圆趾蟹下脚料抗菌肽的制备方法工艺简单且成本较低；采用C18固相萃取柱、葡聚糖凝胶柱和半制备HPLC分离纯化对细点圆趾蟹下脚料酶解产物中抗菌肽富集分离，操作方便且抗菌肽纯度较高、易于工业化生产，所制备的抗菌肽的抑菌效果较强。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 细点 圆趾蟹 下脚料 抗菌 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种细点圆趾蟹下脚料抗菌肽的制备方法，其特征在于包括以下步骤：/na）前处理：将细点圆趾蟹下脚料粉碎，然后进行脱脂处理、干燥粉碎后制得脱脂下脚料；/nb）酶解：将脱脂下脚料加入水制得混合物，液料比为3～5：1，然后向其中加入0.3～0.4wt% ProteAE peptidase在45～55℃酶解处理4～5小时，制得酶解液；/nc）酶解后处理：酶解液灭酶，然后离心处理得到上清液A，将上清液A蒸发浓缩并冷冻干燥制得抗菌肽粗品；/nd）提纯：收集合并具有抑菌活性的洗脱液，再用葡聚糖凝胶色谱进行分离纯化，收集合并具有抑菌活性的洗脱峰，最后将具有抑菌活性肽真空浓缩后再经C18色谱柱进行分离纯化，收集合并具有抑菌活性的洗脱峰，制得细点圆趾蟹下脚料抗菌肽。/n
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