[发明专利]一种文蛤寡肽的制备方法有效
| 申请号： | 201910974680.X | 申请日： | 2019-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN110713518B | 公开（公告）日： | 2021-10-22 |
| 发明（设计）人： | 杨最素;唐云平;余方苗;黄芳芳;陈艳 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C07K7/06 | 分类号： | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/24;C07K1/36 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 尉伟敏 |
| 地址： | 316022 浙江省*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及从文蛤中提取多肽技术领域，为进一步提升文蛤寡肽的提取率，本发明方法提供了一种文蛤寡肽的提取方法，将离子液体EMIMBF4与γ‑丁内酯按体积比1:1复配得到的二元体系应用在文蛤寡肽的制备上，并在低温下施加脉冲电场分解文蛤内脏组织，然后在优化酶解条件下酶解、分离、纯化，得到文蛤寡肽。本发明的文蛤寡肽制备方法中加入离子液体EMIMBF4与γ‑丁内酯按1:1混合制成复配溶剂，低温协同脉冲电场处理，然后再碱性蛋白酶酶解，所得文蛤寡肽的提取率得到提高，而且生物活性也有一定程度的提高，并且省略了0.1mol/L氢氧化钠溶液的脱脂过程。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 文蛤 寡肽 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种文蛤寡肽的制备方法，所述文蛤寡肽的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-Asp，其特征在于，包括以下步骤：/n（1）将新鲜的文蛤洗净后去壳，取内脏、置于水中搅拌浸泡去除杂质，然后将文蛤内脏调整至中性后匀浆处理制备成文蛤匀浆液；/n（2）将文蛤匀浆液与复配溶剂按料液比1:2～4混合均匀获得浸泡液，所用复配溶剂为离子液体EMIMBF4与γ-丁内酯按体积比1:1混合制成；/n（3）降低浸泡液温度至-50～-60℃的低温，向浸泡液中通入脉冲电场处理，然后升至室温；/n（4）离心分离步骤（3）处理后的浸泡液并回收上清液，去离子水洗涤固体并离心分离得到内脏破碎物；/n（5）向内脏破碎物中加入碱性蛋白酶溶液处理，然后灭酶活性，得到酶解液；/n（6）将步骤（5）的酶解液离心分离，取上清液经滤膜过滤，然后经超滤膜处理，截留分子量小于5kDa的分子段产物得到粗肽液；/n（7）将粗肽液层析分离，收集层析最高峰对应的组份，然后经HPLC分离纯化，收集色谱最高峰对应的组份，冷冻干燥，得到文蛤寡肽。/n
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