[发明专利]一种将iPS细胞定向诱导分化到成熟神经元的方法有效

专利信息
申请号: 201910975720.2 申请日: 2019-10-15
公开(公告)号: CN110656089B 公开(公告)日: 2021-02-09
发明(设计)人: 杨通;朱智;陈珺 申请(专利权)人: 上海捷易生物科技有限公司
主分类号: C12N5/10 分类号: C12N5/10
代理公司: 上海沪慧律师事务所 31311 代理人: 朱九皋
地址: 201203 上海市浦东新*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种将iPS细胞定向诱导分化到成熟神经元的方法,包括如下步骤:人iPS细胞的无异源成份培养方式培养;iPS细胞定向诱导分化到成熟神经元。本发明提供的将iPS细胞定向诱导分化到成熟神经元的方法,安全、无病毒处理、无外源血清成分干扰,并且可以从iPS细胞起始,在体外培养中简便、快速、高效的诱导分化到成熟神经元;而且在形成神经球之前有一次6倍的细胞扩增,最终可以获取大量的成熟神经元,为进一步研究和治疗神经系统疾病提供了一种有效的细胞模型。
搜索关键词: 一种 ips 细胞 定向 诱导 分化 成熟 神经元 方法
【主权项】:
1.一种将iPS细胞定向诱导分化到成熟神经元的方法,其特征在于,包括如下步骤:/nS0,使用mTeSR1细胞培养液培养iPS细胞至60%~80%的密度后进行细胞传代,此时仍用mTeSR1细胞培养液培养;/nS1,iPS细胞传代第二天将mTeSR1细胞培养液更换为含有小分子化合物组合1的神经分化培养液,培养6-7天;/nS2,分散酶将细胞消化并按1孔传代6孔的比例转至基质胶包被处理过的孔板内,更换培养液为含有小分子化合物组合2的神经分化培养液,培养6天;/nS3,分散酶将细胞消化并悬浮培养于神经分化培养液中10-12天;/nS4,Accutase细胞消化液将细胞消化3~8分钟后贴壁,神经元贴壁培养液中培养7-8天可以得到成熟的神经元。/n
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