[发明专利]一种腈菌唑单克隆抗体的制备及其应用在审
| 申请号： | 201910976783.X | 申请日： | 2019-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN110684111A | 公开（公告）日： | 2020-01-14 |
| 发明（设计）人： | 吴小胜;贾芳芳;朱亮亮;何方洋;崔海峰;张瑜;崔娜;赵正苗 | 申请（专利权）人： | 北京勤邦生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/44 | 分类号： | C07K16/44;C07D249/04;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/543 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 102206 北京市昌平*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种腈菌唑单克隆抗体的制备方法，并将其应用于腈菌唑残留检测试纸条和酶联免疫试剂盒。试纸条包括：样品吸收垫(1)、结合物释放垫(2)、反应膜(3)、吸水垫(4)和底板(7)，所述反应膜上具有包被有腈菌唑半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线(5)和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线(6)，所述结合物释放垫(2)喷涂有腈菌唑单克隆抗体‑胶体金标记物。试剂盒包括：包被有包被原的酶标板、腈菌唑标准品溶液、腈菌唑抗体、酶结合物浓缩液、酶结合物稀释液、底物显色液、终止液、洗涤液，所述包被原为腈菌唑偶联抗原，所述酶结合物为酶标记的腈菌唑抗体。本发明所提供的试纸条和酶联免疫试剂盒具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低等特点，适合大量样本的筛查和现场监控。 | ||
| 搜索关键词： | 腈菌唑 试纸条 包被 酶联免疫试剂盒 结合物释放垫 单克隆抗体 酶结合物 包被原 反应膜 抗体 酶结合物稀释液 载体蛋白偶联物 胶体金标记物 羊抗鼠抗抗体 底板 标准品溶液 底物显色液 样品吸收垫 残留检测 偶联抗原 现场监控 半抗原 检测线 灵敏度 酶标板 酶标记 浓缩液 试剂盒 吸水垫 洗涤液 质控线 终止液 喷涂 筛查 制备 样本 检测 应用 | ||
【主权项】：
1.一种腈菌唑单克隆抗体，其特征在于所述单克隆抗体由腈菌唑半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述半抗原的制备方法为：/n取2-(4-氯苯基)-2-氰基乙醛1.79g，加二甲基亚砜20ml溶解，加二溴甲烷3.42g，充分搅拌，加相转移催化剂0.4g，加氢氧化钠0.8g，充分搅拌20min，恒温60℃反应12h，停止反应，冷却到室温，加6mol/L盐酸调节pH值到7，加二氯甲烷100ml，水80ml，震荡，静置，分去水相，有机相浓缩蒸干，正己烷/乙酸乙酯(v/v，10/1)80ml重结晶，得到中间化合物b 1.3g，收率47.79％；/n取化合物b 1.3g，加DMF 60ml溶解，加氢氧化钾0.64g，无水碘化钠0.21g，充分搅拌后加入三氮唑0.41g，80℃加热搅拌5h，停止反应，加水150ml，乙酸乙酯120ml，萃取，水洗，浓缩蒸干，上硅胶柱，二氯甲烷/甲醇(v/v，5/1)洗脱分离，得到腈菌唑半抗原0.8g，收率64.33％。/n
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