[发明专利]一种基于响应面优化牛骨髓多肽的超滤膜分离及肽序列鉴定方法在审
| 申请号： | 201910977746.0 | 申请日： | 2019-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN110759964A | 公开（公告）日： | 2020-02-07 |
| 发明（设计）人： | 帕尔哈提·柔孜;吾古力尼沙·麦麦提托合提;杨晓君;尼格热阿依·亚迪卡尔;马生军;王娟 | 申请（专利权）人： | 新疆农业大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/34;C07K7/06;C07K7/08;A61P9/12;A61P39/06;A61P31/04;A61P31/10 |
| 代理公司： | 65106 乌鲁木齐中科新兴专利事务所(普通合伙) | 代理人： | 李静 |
| 地址： | 830052 新疆维吾*** | 国省代码： | 新疆;65 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及一种基于响应面优化牛骨髓多肽的超滤膜分离及肽序列鉴定方法，该方法首先对蛋白提取工艺参数进行合理的筛选和确定，其次通过响应面优化法对蛋白提取液进行超滤膜分离，该方法得到的蛋白含量高达76.9 mg/mL，分离所得部位进一步用离子交换树脂纯化，并用红外光谱、扫描电子显微镜、二维电泳技术及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等对多肽进行结构表征和肽序列的鉴定，共鉴定出20种活性肽段序列，其中抗氧化肽10种、抗菌肽7种、降压肽3种。本发明所述的方法具有提取时间短、操作简单、鉴定技术可靠、效率高等优势，易于工业化生产，且为来源于动物骨髓的抗菌、抗氧化、降压等活性多肽的开发及综合利用提供基础参考。 | ||
| 搜索关键词： | 超滤膜分离 响应面 肽序列 多肽 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 离子交换树脂纯化 扫描电子显微镜 二维电泳技术 蛋白提取液 蛋白提取 动物骨髓 红外光谱 活性多肽 活性肽段 基础参考 鉴定技术 结构表征 抗氧化肽 降压肽 抗菌肽 抗氧化 牛骨髓 降压 抗菌 优化 蛋白 并用 筛选 开发 | ||
【主权项】：
1.一种基于响应面优化牛骨髓多肽的超滤膜分离及肽序列鉴定方法，其特征在于该方法以氯化钠为提取溶剂，通过响应面法优化超滤膜分离工艺，对所得蛋白进行结构表征及肽序列鉴定，并鉴定出20种活性肽段序列，具体操作包括以下步骤：/na、取新鲜牛骨髓粉末，加入浓度为0.5 mol/L的氯化钠溶液，加热搅拌提取，提取温度为45℃，提取时间2小时，提取次数为2次，用分液漏斗分离油水层，水层按体积比1:5加入石油醚进行脱脂，过滤，得到牛骨髓蛋白提取液，提取率和蛋白含量分别为55.3%，56.7 mg/mL；/nb、将步骤a制备的蛋白提取液进行响应面优化超滤膜分离，利用 Design Expert8.0.6 软件进行Box-Behnken 设计，截留膜分子量大小为10 kDa，压力为0.22 Pa，浓缩倍数为5，温度为40℃时蛋白含量和膜通量分别为76.29%，25.29 L/ h.m
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于新疆农业大学，未经新疆农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201910977746.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
