[发明专利]土壤芳基硫酸酯酶活性的荧光光谱检测法在审
| 申请号： | 201911022307.0 | 申请日： | 2019-10-25 |
| 公开（公告）号： | CN110632052A | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 陈伟;孙从建 | 申请（专利权）人： | 山西师范大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 14100 太原科卫专利事务所(普通合伙) | 代理人： | 朱源 |
| 地址： | 041004*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种土壤芳基硫酸酯酶活性的荧光光谱检测法，涉及土壤中酶活性的测定方法领域。本方法包括如下步骤：一、试剂准备：包括芳基硫酸酯酶荧光底物、乙酸盐缓冲液、氢氧化钠终止剂、MU标准品及叠氮化钠溶液；二、试验过程：包括（1）微孔板制备；（2）土壤样品制备；（3）检测过程：使用8通道移液枪分别将土壤悬浮液吸移到样品组所有列中，然后将微孔板置于标准测定温度为30°C的培养箱中培养3个小时；取出微孔板，向所有孔中加入50µL 0.5 M NaOH以终止测定；设定酶标仪的参数，然后将微孔板放入进料口，读取酶标仪荧光板测定值；最后进行计算。本发明操作简单与以前的测定方法相比，分析结果稳定可靠，重现性好；药品用量少。 | ||
| 搜索关键词： | 微孔板 芳基硫酸酯酶 制备 读取 叠氮化钠溶液 乙酸盐缓冲液 土壤悬浮液 标准测定 氢氧化钠 试剂准备 试验过程 通道移液 土壤样品 药品用量 荧光底物 荧光光谱 标准品 检测法 进料口 酶标仪 酶活性 培养箱 样品组 荧光板 终止剂 重现性 土壤 放入 酶标 取出 检测 | ||
【主权项】：
1.一种土壤芳基硫酸酯酶活性的荧光光谱检测法，其特征在于：包括如下步骤：/n一、试剂准备：/n①芳基硫酸酯酶荧光底物制备：将芳基硫酸酯酶的荧光底物4-甲基伞形酮基硫酸酯钾盐14.72mg用无菌去离子水稀释至250 mL，如果7天内不使用，则贮存于50 mL塑料管中冷冻；/n②乙酸盐缓冲液：将4.1 g乙酸钠溶于200 mL去离子水中；滴加乙酸调节至pH 5.0；用去离子水稀释至250 mL，并在4℃下保存备用，至多保存两周；/n③氢氧化钠终止剂：将20 g NaOH溶解在500 mL去离子水中，冷却后，在容量瓶中稀释至1L；/n④MU标准品：将19.82 mg的甲基伞形酮用去离子水定容于100 mL的容量瓶中，溶液包含标准品为1 nmol MU mL
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