[发明专利]一种利用金针菇无菌子实体进行超低温冷冻保存及复苏的方法有效
| 申请号： | 201911038199.6 | 申请日： | 2019-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN110741877B | 公开（公告）日： | 2022-03-15 |
| 发明（设计）人： | 黄春燕;宫志远;姚强;李瑾;韩建东;谢红艳;杨鹏 | 申请（专利权）人： | 山东省农业科学院农业资源与环境研究所 |
| 主分类号： | A01G18/00 | 分类号： | A01G18/00;A01G18/40;A01G18/20;A01N3/00 |
| 代理公司： | 济南竹森知识产权代理事务所(普通合伙) 37270 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 250100 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种利用金针菇无菌子实体进行超低温冷冻保存及复苏的方法，其特征在于包括如下步骤：保存材料的获取：以无菌培养获得的子实体作为保存材料；保存材料的前处理：分别用保护液Ⅰ和保护液Ⅱ处理保存材料；降温保存：将保存材料放入冷冻管，采用0.8～1.2℃/min降温速率降温至‑40℃，然后直接投入液氮中速冻，并在液氮中长期保存；解冻复苏：将保存的冷冻盒取出，迅速将冻存管放入35～37℃水浴中快速解冻；然后室温下用保护液Ⅲ洗涤组织块，最后用灭菌的滤纸吸干组织块上的保护液Ⅲ，将组织块接种于复合PDA平板培养基上恒温培养。本发明获得的保存菌种污染率低、成活率高、不退化且有复壮作用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 金针菇 菌子 实体 进行 超低温 冷冻 保存 复苏 方法 | ||
【主权项】：
1.一种利用金针菇无菌子实体进行超低温冷冻保存的方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)将待保存的金针菇菌种，通过无菌培养获得金针菇子实体，切取子实体菌柄上端的菌柄组织作为待保存的子实体材料；/n(2)将步骤(1)得到的待保存的子实体材料转入保护液Ⅰ中，于20～25℃下处理30～60min；/n所述保护液Ⅰ的成分如下：0.8～1.2mol/L蔗糖、1.8～2.2mol/L甘油、6～8mmol/LKH
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