[发明专利]一种脱硫弧菌培养的培养方法

摘要

本发明涉及一种脱硫弧菌培养的培养方法，首先将制作好的培养基放入培养皿中，将培养皿水平摆放在机械式自调平培养皿架上并进行调平，其次将不同浓度稀释液加入培养皿中，用平板划线法进行接种并加入培养胶，确保无氧环境。最后，为增大接种面积和接种数量，对培养皿进行倾斜培养，调节机械式自调平培养皿架重锤和支撑板之间的角度调节装置至合适角度并进行调平，防止培养皿滑落。本发明提供的方法非常简单方便，适用于使用培养胶进行密封培养脱硫弧菌，减少培养皿架不平或操作者操作对培养皿密封效果的影响，并且适用于脱硫弧菌的倾斜培养，增大培养面积和接种数量，实现培养皿倾斜培养过程中自动调平，保证培养皿倾斜培养实现密封效果。

主权项

1.一种脱硫弧菌培养的培养方法，其特征在于：包括以下步骤：/n步骤1：选用机械式自调平培养皿架：/n所述机械式自调平培养皿架，包括支撑架、培养皿支架、培养皿支撑板和重锤；/n所述培养皿支架包括呈凸字型结构的支架主体，所述支架主体的两侧设有沿支架主体中心线长度方向延伸且与支撑架配合的通孔，在支架主体的通孔下端部还固定连接有调整螺母；所述支撑架穿过支架主体两侧的通孔并与调整螺母螺纹连接，调整螺母可沿支撑架上下移动推动支架主体上下移动，且所述调整螺母由紧定螺钉固定；/n所述支架主体的上端两侧对称设有由外向内的L型伸出凸台，所述支架主体的中部上下两端设有连通的上锥形孔和下锥形孔，且上锥形孔内设有与其配合的锥形橡皮垫；所述重锤设置在凸型支架主体的中部，所述重锤的杆体依次穿过下锥形孔、锥形橡皮垫和上锥形孔，该重锤的杆体直径大于锥形橡皮垫的内径，且所述重锤的杆体端部与培养皿支撑板之间设有角度调整装置；/n所述培养皿支撑板设置在支架主体的上端部与L型伸出凸台的上端部之间，所述培养皿支撑板下端设有承压泡沫板，上端设有边长大于培养皿直径的正方形围栏；所述培养皿支撑板的正方形围栏内放置防滑垫，所述防滑垫上放置培养皿，所述培养皿支撑板外侧设有裙边，裙边上下两侧分别设有上侧缓冲弹簧和下侧缓冲弹簧，所述上侧缓冲弹簧设置在培养皿支架的L型伸出凸台和培养皿支撑板上端之间，下侧缓冲弹簧设置在培养皿支架和与培养皿支撑板下端之间；其中，所述上侧缓冲弹簧包括上侧缓冲内弹簧和上侧缓冲外弹簧，下侧缓冲弹簧包括下侧缓冲内弹簧和下侧缓冲外弹簧；/n步骤2：培养基制作：/n取3-5g/L牛肉膏、8-10g/L蛋白胨、65-75g氯化钠、蒸馏水1000ml，加热熔化后，调节PH值至7.0-7.2，制作肉汤培养基，灭菌后并保温在45℃-60℃；将培养皿经过灭菌后加入肉汤培养基，肉汤培养基高度均匀覆盖培养皿底面即可，然后将装有肉汤培养基的培养皿放置在机械式自调平培养皿架上进行调平放置，并静置3-5min；/n步骤3：脱硫弧菌的分离与纯化：/n试验材料选自污水处理场，将污水分别稀释至、、浓度的溶液，用5ml移液管分别从不同浓度稀释液中吸取0.2-0.4ml菌液放入步骤2静置后的培养皿中，并将培养皿取出摇晃使菌液将培养皿涂布均匀；/n步骤4：脱硫弧菌的接种及接种面的密封：/n首先，在步骤3处理后的培养皿中采用平板划线法对脱硫弧菌进行接种；其次，在脱硫弧菌上缓慢导入培养胶进行密封，确保无氧环境，盖上培养皿盖；/n步骤5：脱硫弧菌培养皿在培养皿架上的倾斜培养：/n首先，将步骤4密封的培养皿缓慢放入机械式自调平培养皿架，然后旋转机械式自调平培养皿架的重锤与培养皿支撑板之间的角度调整装置，使重锤与支撑板之间呈5°-15°，确保培养基不会洒出，最后机械式自调平培养皿架利用重锤的指向作用进行倾斜调平，维持培养所需的倾斜角度；/n步骤6：脱硫弧菌培养条件设置：/n采用继代保存方法，数周做一次继代培养；新分离的菌种，每3-4星期传代一次，被保存的菌种，放在室温暗处。/n