[发明专利]基于液相色谱-质谱的中药养护贴有效成分检测分析方法

摘要

本发明公开了一种基于液相色谱‑质谱的中药养护贴有效成分检测分析方法，涉及中草药成分检测技术领域。本发明通过使用液相色谱‑串联三重四极杆质谱联用仪，建立中药养护贴中绿原酸、紫丁香苷、芦丁、毛蕊异黄酮、槲皮素、木犀草素、山奈酚、高车前素、蛇床子素九种特征物质的定量方法，利用九种关键有效成分标准品进行仪器分析方法优化。本发明通过利用九种关键有效成分标准品进行仪器分析方法优化，包括液相色谱条件优化、质谱检测条件及质谱参数优化，使九种化合物峰形对称并能达到基线分离，同时使得质谱能够准确定性，而且定量灵敏度达到最优，该方法具有简单快速、样品量少、精确、重复性好且灵敏度高的优势。

主权项

1.基于液相色谱-质谱的中药养护贴有效成分检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：/nSS01：选取液相色谱柱并设定质谱条件、参数；/nS011：设定色谱柱温度为30℃，设定流动相及流动相梯度，其中，水相A：0.01％甲酸水、有机相B：甲醇；/nS012：设定质谱条件：离子源为ESI离子源，离子源温度为350℃，雾化器工作压力为35psi，干燥气流速为9L/min；/nS013：设定质谱定性定量检测模式：正离子模式、多反应监测模式，设定多反应监测模式参数；/nSS02：标准储备溶液制备/nS021：分别准确称取0.1g的中药养护贴中九种关键有效成分的标准品，称量精确至0.0001g；/nS022：用甲醇溶解后分别转移至50mL容量瓶中，定容，分别配制出2000μg/mL的九种关键有效成分的标准储备液；/nSS03：系列标准溶液制备/nS031：分别准确量取九种关键有效成分的标准储备液，用含50％甲醇的水溶液配制成浓度分别为0.01μg/mL、0.05μg/mL、0.1μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL、10μg/mL的九种关键有效成分的系列混合标准溶液；/nSS04：通过九种关键有效成分标准溶液进行仪器分析方法优化，获得优化后的LC-MS/MS绝对定量分析方法，其中，所述仪器为液相色谱-串联三重四极杆质谱联用仪；/nSS05：样品前处理/nS051：剥开产品包装，取中药养护贴填充精华素0.2g于10mL离心管中，加入4mL提取溶剂，超声提取30min，离心20min，取上清；其中，离心转速为3000rpm；/nS052：向步骤S051的沉淀中再加入4mL提取溶剂，超声提取30min，离心20min，取上清；/nSS06：合并步骤S051、S052中的上清提取液，取1mL过0.22μm滤膜，对滤液进行上机测试；/nSS07：绘制标准曲线，根据建立的LC-MS/MS绝对定量分析方法对中药养护贴中九种关键有效成分进行分析评价，获取九种关键有效成分在中药养护贴中含量结果，并根据结果对中药养护贴测试结果分析。/n