[发明专利]一种提高哺乳动物胚胎体外存活率的培养方法有效
申请号: | 201911059937.5 | 申请日: | 2019-11-01 |
公开(公告)号: | CN110628707B | 公开(公告)日: | 2020-07-24 |
发明(设计)人: | 邱寒峰;吴婷;徐雅萍;董信阳 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073;C12N5/075;C12M3/00;C12M1/34;C12M1/04 |
代理公司: | 杭州橙知果专利代理事务所(特殊普通合伙) 33261 | 代理人: | 贺龙萍 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高哺乳动物胚胎体外存活率的培养方法,包括以下步骤:(1)从母羊身上取得羊卵母细胞置入成熟培养液内,在培养箱内培养20‑24小时,获得成熟的羊卵母细胞;(2)将成熟的羊卵母细胞与精子一同放入受精培养液中,在培养箱内培养18‑24小时,进行受精,获得早期羊胚胎;(3)将受精后的羊胚胎用TCM199培养液进行反复冲洗,之后放入羊胚胎体外培养液中,并置入培养箱中进行胚胎体外培养,该培养箱内温度维持在38‑39℃,气体浓度维持在5%CO2;其中,上述培养箱包括培养室、室门、与该培养室相连通的气体浓度调节室;所述培养室内具有多个培养仓,多个培养仓内分别上设有培养基放置架和隔断装置。本发明的培养箱内环境的稳定性,保障胚胎的存活率。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 哺乳动物 胚胎 体外 存活率 培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种提高哺乳动物胚胎体外存活率的培养方法,其特征在于:包括以下步骤:/n(1)从母羊身上取得羊卵母细胞置入成熟培养液内,在培养箱内培养 20-24 小时,获得成熟的羊卵母细胞;/n(2)将成熟的羊卵母细胞与精子一同放入受精培养液中,在培养箱内培养18-24小时,进行受精,获得早期羊胚胎;/n(3)将受精后的羊胚胎用TCM199培养液进行反复冲洗,之后放入羊胚胎体外培养液中,并置入培养箱中进行胚胎体外培养,该培养箱内温度维持在38-39℃,气体浓度维持在5%CO2;/n其中,上述培养箱包括培养室(1)、与该培养室相配合的室门(2)、与该培养室相连通的气体浓度调节室(3);所述培养室(1)内具有多个培养仓(11),多个培养仓内分别上设有培养基放置架(4)和隔断装置,所述培养基放置架(4)可插入至培养仓(11)内,且插入后培养基放置架(4)与培养仓(11)的进口处密封配合;上述培养步骤过程中需要对培养箱内的不同位置上胚胎进行观察时,操作者可将培养基放置架(4)由独立的培养仓(11)中抽出,并且培养基放置架(4)被抽出的过程中,所述隔断装置将隔断对应培养仓(11)与外界的连通。/n
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