[发明专利]哺乳动物角膜的脱细胞方法有效
| 申请号： | 201911066859.1 | 申请日： | 2019-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN110755687B | 公开（公告）日： | 2023-01-17 |
| 发明（设计）人： | 王海利;张晋南;宇咏梅;唐小琪;马百双;甘良波 | 申请（专利权）人： | 深圳艾尼尔角膜工程有限公司 |
| 主分类号： | A61L27/36 | 分类号： | A61L27/36 |
| 代理公司： | 北京康盛知识产权代理有限公司 11331 | 代理人： | 董娣 |
| 地址： | 518112 广东省深圳市龙岗区吉华街道甘李*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种哺乳动物角膜的脱细胞方法，包括预处理步骤和脱细胞步骤，所述预处理步骤包括清洗、刮净和削切，以获取厚度为200‑500μm的板层角膜，在经过所述脱细胞步骤包括冷冻、温融和脱除，以去除细胞，得到透明性好、结构致密，接近于人体角膜的自然特性的脱细胞角膜基质。本发明使用温和的中性蛋白酶和EDTA作为脱细胞试剂，有利于保持角膜的微观结构。本发明将角膜浸于脱细胞液中振荡处理之后，再在等渗液中进行超声，有效缩短角膜与酶的接触时间，在达到脱掉细胞目的的同时，能够使角膜基本结构得以保持。 | ||
| 搜索关键词： | 哺乳动物 角膜 细胞 方法 | ||
【主权项】：
1.哺乳动物角膜的脱细胞方法，包括预处理步骤和脱细胞步骤，其特征在于：所述预处理步骤包括清洗、刮净和削切；所述脱细胞步骤包括冷冻、温融和脱除；/n所述清洗是指：将获取的哺乳动物眼球用清洗液进行清洗，所述清洗液为含有抗生素的无菌PBS溶液；所述刮净是指：刮去角膜上皮层以使前弹力层暴露，以去除上皮层细胞；所述削切是指：对清洗刮净后的角膜进行削切，以获取厚度为200-500μm的板层角膜；/n所述冷冻包括：将角膜密封后置于液氮中5-60min；所述温融包括：将冷冻后的角膜置于水浴中以使其解冻；所述脱除包括：先将温融后的角膜放入脱细胞试剂中进行振荡处理，再将角膜置于等渗液中进行超声处理；所述脱细胞试剂包含0.2-1.0％中性蛋白酶和0.01-0.20％EDTA；所述等渗液为：具有不会使角膜胶原纤维结构改变的渗透压参数的溶液。/n
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