[发明专利]一种农杆菌介导的薏苡遗传转化方法在审
| 申请号： | 201911068229.8 | 申请日： | 2019-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN110656129A | 公开（公告）日： | 2020-01-07 |
| 发明（设计）人： | 赵懿琛;谢梅;曾晓芳;王兰兰;王银;赵德刚 | 申请（专利权）人： | 贵州大学 |
| 主分类号： | C12N15/84 | 分类号： | C12N15/84 |
| 代理公司： | 11333 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 胡敬红 |
| 地址： | 55002*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | 本发明涉及了一种一种农杆菌介导的薏苡遗传转化方法。本方法以薏苡成熟种子经过催芽处理后横切其茎尖分生组织为遗传转化受体，具体操作步骤如下：(1)遗传转化受体的准备，(2)农杆菌的培养，(3)薏苡的遗传转化，(4)转基因植株的移栽、管理。本发明不经过组织培养技术，除培养农杆菌外，无需无菌操作，使用本方法具有操作简单、成本较低、能够转化大片段DNA、遗传稳定、拷贝数低等优点，已经成为目前应用最广泛的遗传转化方法。 | ||
| 搜索关键词： | 遗传转化 薏苡 农杆菌 茎尖分生组织 组织培养技术 农杆菌介导 转基因植株 大片段DNA 成熟种子 催芽处理 无菌操作 遗传稳定 拷贝数 横切 移栽 转化 应用 管理 | ||
【主权项】：
1.一种利用农杆菌介导的薏苡遗传转化方法，包括下列步骤：/n(1)遗传转化受体的准备：薏苡种子萌发，茎尖长至茎尖长至2-3cm，用手术刀将萌发的薏苡茎尖横切，暴露其茎尖分生组织，以待备用；/n(2)农杆菌的培养：将根瘤农杆菌菌株LBA4404与含待转入基因的载体一并接种到带含卡那霉素和利福平的YEP固体培养基上，培养2d；挑取单菌落至含卡那霉素和利福平的YEP液体培养基中，振荡培养16小时；将培养好的菌液加入到新的含卡那霉素和利福平的YEP液体培养基中振荡培养至OD
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