[发明专利]研究家蚕基因抑制BmNPV DNA复制相关基因的表达的方法在审
申请号: | 201911086586.7 | 申请日: | 2019-11-08 |
公开(公告)号: | CN110940807A | 公开(公告)日: | 2020-03-31 |
发明(设计)人: | 夏定国;张园;赵巧玲;张业顺 | 申请(专利权)人: | 江苏科技大学 |
主分类号: | G01N33/573 | 分类号: | G01N33/573;G01N33/68;G01N33/561;C12N15/866 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 余俊杰 |
地址: | 212003 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了研究家蚕基因抑制BmNPV DNA复制相关基因的表达的方法,所述方法包括以下步骤:(1)引物设计根据质粒克隆所需的步骤,设计合成克隆所用引物;(2)重组质粒构建构建重组质粒pFastBacDual‑polyhedrin‑A3‑Bmlipase‑1;(3)重组病毒构建将步骤(2)制得的重组质粒转化E.coli DH10BacΔEGT细胞以构建重组Bacmid;(4)结果验证验证步骤(3)制得的重组Bacmid对BmNPV DNA复制相关基因的影响;验证DBP的表达量变化;EMSA法验证蛋白质与核酸的相互作用;分析缺失Bmlipase‑1结合位点的dbp启动子活性。与现有技术相比,本发明具有以下优点:本发明在构建可表达Bmlipase‑1的重组病毒的基础上,在细胞内分析Bmlipase‑1对病毒复制相关基因的影响,并运用EMSA研究Bmlipase‑1的作用位点,阐明了Bmlipase‑1抑制BmNPV复制增殖的机制。 | ||
搜索关键词: | 研究 家蚕 基因 抑制 bmnpv dna 复制 相关 表达 方法 | ||
【主权项】:
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