[发明专利]基于ICP-MS精液质量的检测方法和应用

摘要

本发明公开了一种基于ICP‑MS精液质量的检测方法和应用，将砷、镉、汞作为精液质量下降的效应标志物进行检测的方法，该方法为采用ICP‑MS检测男性血清中的砷、镉、汞的浓度，具体包括以下步骤：步骤一：检测材料：医院生殖门诊随机纳入精液质量下降的男性多组及正常的对照男性多组；步骤二：样本采集：采用促凝管收集正常男性血液，在4℃条件离心5min离心转速为3000rpm，分离出100μl血清，放置于‑80℃冰箱保存待用；本发明通过ICP‑MS检测确定病例组血清中具有较高水平的砷、镉、汞浓度，然后通过Logistic回归发现砷、镉、汞暴露增加了精液质量下降的风险，血清中砷、镉、汞浓度可作为精液质量下降的效应标志物，检测砷、镉、汞暴露可以用于精液质量的早期筛查。

主权项

1.基于ICP-MS精液质量的检测方法和应用，其特征在于将砷、镉、汞作为精液质量下降的效应标志物进行检测的方法，该方法为采用ICP-MS检测男性血清中的砷、镉、汞的浓度，具体包括以下步骤：/n步骤一：检测材料：医院生殖门诊随机纳入精液质量下降的男性多组及正常的对照男性多组；/n步骤二：样本采集：采用促凝管收集正常男性血液，在4℃条件离心5min离心转速为3000rpm，分离出100μl血清，放置于-80℃冰箱保存待用；/n步骤三：试剂盒准备：/n试剂A：4.9ml稀释剂含0.1％v/v曲拉通+1％v/v硝酸+10μg/L锗、铑、铋；/n试剂B：砷标准曲线：浓度分别为0、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5μg/L；/n试剂C：镉标准曲线：浓度分别为0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5μg/L；/n试剂D：汞标准曲线：浓度分别为0、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5μg/L；/n试剂E：清洗液：2％v/v硝酸；/n步骤四：检测前准备：/n①100μl样本4℃条件下融化后，加入4.9ml试剂A稀释，充分混匀；/n②ICP-MS点火启动后，稳定约半小时，泵入1ppb调谐液，根据Li、In和U的灵敏度，氧化物CeO以及双电荷Ba2+的水平，对全部质量范围4-290amu进行调谐并达到最佳状态；/n步骤五：数据分析和处理：使用Qtegra软件在线对数据进行定量评估，以内标锗、铑、铋分别用于校正砷、镉和汞的浓度，将样品名称、待测元素名称、浓度或信号强度值等导出至excel表格中；/n步骤六：数据对比：采用多元Logistic回归分析砷、镉、汞暴露对精液质量的影响；/n步骤七：得出结论：血清中砷、镉、汞浓度可作为精液质量下降的效应标志物，检测砷、镉、汞暴露可以用于精液质量的早期筛查。/n