[发明专利]一种鸭TLR7真核表达重组质粒载体的构建与鉴定方法在审
申请号: | 201911157014.3 | 申请日: | 2019-11-22 |
公开(公告)号: | CN110872597A | 公开(公告)日: | 2020-03-10 |
发明(设计)人: | 李国勤;卢立志;顾天天;田勇;陈黎;曾涛;李柳萌;沈军达;陶争荣;杜雪;徐坚 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C12N15/66 | 分类号: | C12N15/66;C12Q1/6869;C12N15/70 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 韩晶 |
地址: | 310021 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种鸭TLR7真核表达重组质粒载体的构建与鉴定方法,包括以下步骤:步骤1、鸭TLR7基因PCR扩增及回收;步骤2、In Fusion进行载体和目的片段的重组;步骤3、菌落PCR检测。本发明在PCR上游引物起始密码子ATG前加入Kodak序列和BamHI酶切位点,这样得到的PCR产物用限制酶消化产生粘性末端,即可与有互补粘端的载体DNA重组,这种克隆方法效率较高,并可通过测序有效地鉴定PCR产物,本发明具有:①快速:仅需要15分钟反应时间;②简单:不受片段酶切位点的影响,无需对片段酶切;③高效:阳性率达95%以上;④无缝:不引入额外的序列等优点。 | ||
搜索关键词: | 一种 tlr7 表达 重组 质粒 载体 构建 鉴定 方法 | ||
【主权项】:
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