[发明专利]一种水环境中人类粪便指示物的定量检测方法在审

专利信息
申请号: 201911178556.9 申请日: 2019-11-27
公开(公告)号: CN110819699A 公开(公告)日: 2020-02-21
发明(设计)人: 陈颖;段宇婧;毛大庆;罗义;李丽丹 申请(专利权)人: 辽宁大学
主分类号: C12Q1/6851 分类号: C12Q1/6851;C12Q1/70;C12N15/70;C12R1/92
代理公司: 沈阳杰克知识产权代理有限公司 21207 代理人: 金春华
地址: 110000 辽宁*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要: 发明涉及一种水环境中人类粪便指示物的定量检测方法。包括:选用人类粪便DNA为模板,采用PCR扩增目的基因CPQ_056片段;切胶回收纯化扩增后的目的基因,将基因连接在载体pTOPO‑Blunt上,然后转化感受态大肠杆菌细胞,挑选阳性克隆子;用琼脂糖凝胶电泳检测扩大培养菌液的质量,选克隆成功的菌液提取质粒,检测质粒浓度,换算出质粒所携带目的基因的拷贝数,并按10倍为稀释梯度稀释,作为标准品;将标准品进行定量PCR扩增,做出标准曲线。再将水样DNA进行定量PCR扩增,从而最终得出水环境中人类粪便指示基因的拷贝数。本发明不依赖于微生物培养,操作简单,检测速度高,灵敏度高,数量上也更为直观。
搜索关键词: 一种 水环境 人类 粪便 指示 定量 检测 方法
【主权项】:
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