[发明专利]一种成熟肝细胞的长期体外培养方法有效
申请号: | 201911181287.1 | 申请日: | 2019-11-27 |
公开(公告)号: | CN110923192B | 公开(公告)日: | 2022-03-08 |
发明(设计)人: | 李文林;孙平新;张冠宇 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 孙跃虹 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种采用微阵列玻片作为培养支持物进行成熟肝细胞的长期体外培养方法,包括如下步骤:A、采用含有1%基质胶的DMEM/F12培养基预先包被微阵列玻片,于4℃保存过夜;B、采用不含有基质胶的BM培养体系将原代肝细胞种植于预先包被的微阵列玻片上,2小时后换液去除未贴壁细胞,之后每天换液,直至3周。其中,BM培养体系包括液体基础培养基、0~5×B27添加剂、0~5×N2添加剂、1%青链霉素/链霉素、0‑100mM尼克酰胺、0‑1mM地塞米松、0‑500μg/mL维生素C。经检测,微阵列玻片上培养的肝细胞几乎无应力纤维产生,Alb和Hnf4α等成熟肝细胞的标志物的表达可以得到长期维持,从而实现长期维持肝细胞的功能和表型。 | ||
搜索关键词: | 一种 成熟 肝细胞 长期 体外 培养 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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