[发明专利]同时检测血液中25羟基-维生素D3和25羟基-维生素D2含量的方法在审
申请号: | 201911214546.6 | 申请日: | 2019-12-02 |
公开(公告)号: | CN110726799A | 公开(公告)日: | 2020-01-24 |
发明(设计)人: | 贾永娟;倪君君 | 申请(专利权)人: | 成都和合医学检验所有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 37100 济南信达专利事务所有限公司 | 代理人: | 程佩玉 |
地址: | 610100 四川省成都市成都经*** | 国省代码: | 四川;51 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明提供了同时检测血液中25羟基‑维生素D3和25羟基‑维生素D2含量的方法。利用高效液相串联质谱仪分别检测至少三个标准溶液,得到各个标准溶液的色谱图,各标准溶液中均含有浓度已知的25羟基‑维生素D3及D2的标准品和内标物;根据各个标准溶液的色谱图拟合得到标准曲线方程;将混合内标工作液添加到经处理至少2mL待检测血液而得到的50‑200μL血液样本中,并顺次加入蛋白沉淀试剂、萃取剂和复溶液,超声1‑3min后离心取上清液得到待测样本;同样检测待测样本得到其色谱图;根据待测样本的色谱图和各个标准曲线方程,计算血液样本中25羟基‑维生素D3和D2的含量。本方案适用于成人血液的检测。 | ||
搜索关键词: | 标准溶液 色谱图 羟基 维生素 待测样本 检测 标准曲线方程 蛋白沉淀试剂 计算血液样本 血液 成人血液 高效液相 取上清液 血液样本 标准品 复溶液 工作液 内标物 质谱仪 萃取剂 超声 内标 拟合 串联 | ||
【主权项】:
1.同时检测血液中25羟基-维生素D3和25羟基-维生素D2含量的方法,其特征在于,包括:/n利用高效液相串联质谱仪,在一定检测条件下,分别检测至少三个标准溶液,得到各个标准溶液的色谱图,其中,任一标准溶液中均含有浓度已知的25羟基-维生素D3的标准品及内标物、25羟基-维生素D2的标准品及内标物,不同标准溶液中同一标准品的浓度不同;/n根据各个标准溶液的色谱图,拟合得到25羟基-维生素D3的标准曲线方程和25羟基-维生素D2的标准曲线方程;/n将一定量的混合内标工作液添加到50-200μL血液样本中,加入一定量的蛋白沉淀试剂后涡旋混匀,再加入一定量的萃取剂,涡旋混匀后离心取上清液,将上清液吹干后加入一定量的复溶液并涡旋混匀,超声1-3min后离心取上清液得到待测样本;其中,所述血液样本经处理至少2mL待检测血液而得到,所述混合内标工作液中含有浓度已知的25羟基-维生素D3的内标物和25羟基-维生素D2的内标物;/n利用高效液相串联质谱仪,在相同检测条件下,检测所述待测样本,得到待测样本的色谱图;/n根据待测样本的色谱图和拟合得到的各个标准曲线方程,计算所述血液样本中25羟基-维生素D3和25羟基-维生素D2的含量。/n
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