[发明专利]一种双水相萃取结合超滤法制备木瓜蛋白酶的方法有效
| 申请号： | 201911218550.X | 申请日： | 2019-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN110760493B | 公开（公告）日： | 2021-07-23 |
| 发明（设计）人： | 刘汉惜 | 申请（专利权）人： | 海南南国健康产业有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/50 | 分类号： | C12N9/50 |
| 代理公司： | 北京天作专利代理事务所(特殊普通合伙) 11727 | 代理人： | 王影 |
| 地址： | 571200 海南*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种双水相萃取结合超滤法制备木瓜蛋白酶的方法，包括以下步骤：(1)将未成熟的青皮木瓜进行破碎处理，将破碎后的木瓜加入到由乙二胺四乙酸、氯化钠和半胱氨酸盐酸盐组成的溶液中进行充分混合；(2)将混合液中不溶的皮渣过滤掉，将过滤后得到的滤液在3‑10℃环境下经离心、冷冻干燥后得到木瓜乳汁粗提酶；(3)将木瓜乳汁粗提酶加入到由成相剂、萃取辅助剂组成的四元双水相体系中，经充分混合后，静止待形成明显的上下相，含酶的萃取液位于上相，回收上相，对上相萃取液进行超滤处理；(4)对超滤后的液体进行浓缩处理；浓缩液经冷冻干燥后，获得纯净的木瓜蛋白酶。使用该方法可以获得较高的产品纯度和回收率，适合工业推广应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 双水相 萃取 结合 超滤 法制 木瓜蛋白酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种双水相萃取结合超滤法制备木瓜蛋白酶的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：/n(1)将未成熟的青皮木瓜进行破碎处理，将破碎后的木瓜加入到由乙二胺四乙酸、氯化钠和半胱氨酸盐酸盐组成的溶液中进行充分混合；/n(2)将混合液中不溶的皮渣过滤掉，将过滤后得到的滤液在3-10℃环境下经离心、冷冻干燥后得到木瓜乳汁粗提酶；/n(3)将木瓜乳汁粗提酶加入到由成相剂、萃取辅助剂组成的四元双水相体系中，经充分混合后，静止待形成明显的上下相，含酶的萃取液位于上相，回收上相，对上相萃取液进行超滤处理；/n(4)对超滤后的液体进行浓缩处理；浓缩液经冷冻干燥后，获得纯净的木瓜蛋白酶。/n
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