[发明专利]一种紫苏叶中抗过敏成分的分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种紫苏叶中抗过敏成分的分离纯化方法，首先将新鲜紫苏叶经过常温阴干、粉碎过筛、溶剂浸泡、强化传质法进行提取，得到紫苏抗过敏粗成分，再运用薄层色谱法确定洗脱溶剂，硅胶柱层析法和葡聚糖凝胶柱层析法对紫苏抗过敏粗提物成分进行纯化，即可得到具有透明质酸酶抑制率高达89.76％的高抗过敏活性紫苏提取物。本发明提供的分离纯化方法，具有操作简单，用时少，得率高，活性显著，结果重现性好等优点，适合大多数植物活性物质的分离与纯化。

主权项

1.一种紫苏叶中抗过敏成分的分离纯化方法，其特征在于：包括如下步骤：/nS1、精选新鲜紫苏叶，洗净，常温阴干，粉碎过100目筛；/nS2、以步骤S1得到的紫苏粉末为材料，按料液比为1kg∶10-30L的比例添加适量70％的乙醇溶液，润料2h；/nS3、将润料完成的原料置于高速分散器上，仪器条件设置为11000r/min，分散时间1min，分散处理3-7次，将上层溶液倒出，收集；/nS4、将残渣按料液比为1kg∶10-30L的比例与适量70％乙醇溶液混合，进行高速分散操作，收集上层溶液；/nS5、合并步骤S3和步骤S4所得的上层溶液并抽滤，将得到的澄清溶液50℃烘干，得到紫苏抗过敏成分粗提物；/nS6、将所得的紫苏抗过敏成分粗提物利用薄层色谱进行点板，用不同梯度的石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-乙醇和纯乙醇进行展开，在显色剂中染色后根据斑点的高度确定洗脱溶剂梯度；/nS7、将步骤S5得到的粗提物与硅胶按质量比1∶1的比例混合均匀，湿法装柱，将样品环绕倒入层析柱中，洗耳球敲匀柱面；/nS8、依次用石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯-乙醇和纯乙醇作为洗脱剂进行梯度洗脱，每个洗脱梯度收集五个柱体积，利用薄层色谱技术进行检测，合并相似组分，获得P1～P12共12个组分，分别用旋转蒸发仪浓缩至浸膏；/nS9、取步骤S8所得浸膏，利用透明质酸酶体外抑制实验进行活性检测，计算抗过敏能力，筛选透明质酸酶抑制率最高的浸膏；/nS10、取步骤S9筛选所得的浸膏，用少量乙醇溶解，将溶液全部转移到Sephadex LH-20凝胶柱，用纯乙醇溶剂进行洗脱，每10mL一管收集洗脱液；/nS11、将洗脱液利用薄层色谱技术进行检测，合并相似组分，得到的6个组分K1～K6，分别用旋转蒸发仪浓缩至浸膏；/nS12、取步骤S11所得浸膏，利用透明质酸酶体外抑制实验进行活性检测，计算抗过敏能力，得到透明质酸酶抑制率高达89.76％的K3组分。/n