[发明专利]一种大引物PCR定点突变的方法在审
申请号: | 201911326409.1 | 申请日: | 2019-12-20 |
公开(公告)号: | CN110964717A | 公开(公告)日: | 2020-04-07 |
发明(设计)人: | 钟先锋;杨思婷;苏思韵;张宇博;黄珍金;吕蕾 | 申请(专利权)人: | 佛山科学技术学院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 朱继超 |
地址: | 528000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本公开提供了一种大引物PCR定点突变的方法,所述方法的操作步骤为:(1)根据目的基因序列设计引物,得到两个侧翼引物,分别为上侧翼引物和下侧翼引物;(2)根据突变碱基所处序列位置设计突变引物,突变位点位于突变引物序列的中间位置;(3)由突变引物与距突变位点较远的侧翼引物进行第一步PCR反应得到大引物;(4)将得到的大引物中加入两个侧翼引物进行第二步PCR扩增,得到突变目的基因序列。所述方法中在设计突变引物时,是将突变位点设计于突变引物序列的中间位置,这样使得在后续PCR反应中,有利于突变引物与模板的结合,从而提高了突变率。 | ||
搜索关键词: | 一种 引物 pcr 定点 突变 方法 | ||
【主权项】:
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