[发明专利]表达Caspase-3重组scFv78的重组大肠杆菌及其功能验证方法在审

专利信息
申请号: 201911365340.3 申请日: 2019-12-26
公开(公告)号: CN111088204A 公开(公告)日: 2020-05-01
发明(设计)人: 陈廷涛;田溥塬 申请(专利权)人: 南昌大学
主分类号: C12N1/21 分类号: C12N1/21;C12N15/66;C12N15/70;G01N33/573;C12R1/19
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 330000 江西省*** 国省代码: 江西;36
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摘要: 发明提供了一种表达Caspase‑3重组scFv78的重组大肠杆菌及其功能验证方法。该技术方案首先将整合有Caspase‑3编码基因的重组单链抗体scFv78编码基因通过酶切酶连的方法与pET302载体连接,再利用所得的重组质粒转化至大肠杆菌Nissle1917中,从而得到能够表达Caspase‑3重组scFv78的菌株。本发明中采用大肠杆菌Nissle1917的胞内侵袭、聚集的特性和scFv78对TEM1阳性细胞的定点靶向特性,实现人源毒素Caspase‑3蛋白位点特异性地发挥作用,从而更准确地杀伤TEM1阳性肿瘤细胞,降低对机体正常细胞的损伤。在此基础上,本发明利用重组菌表达人源毒素Caspase‑3重组单链抗体scFv78蛋白,再在体外环境下将蛋白与MS1‑TEM1细胞共孵育,从而验证其对肿瘤细胞的亲和力及杀伤力。
搜索关键词: 表达 caspase 重组 scfv78 大肠杆菌 及其 功能 验证 方法
【主权项】:
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