[发明专利]一种从植物叶片中提取纯化内质网及其蛋白的有效方法有效
申请号: | 201911405514.4 | 申请日: | 2019-12-30 |
公开(公告)号: | CN111004766B | 公开(公告)日: | 2022-03-18 |
发明(设计)人: | 朱玮;欧钰婷;田景奎;李守信;刘胜志;钟卓珩 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;C07K14/415;C07K1/30 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 万尾甜;韩介梅 |
地址: | 310058 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种从植物叶片中提取纯化内质网及其蛋白的有效方法,该方法以植物叶片为材料,通过调整材料类型、材料用量、研磨方式、离心转子类型、蛋白重悬方式等过程,结合差速离心方法,得到了高质量的植物叶片内质网蛋白。采用15天左右的适龄植物叶片,新鲜叶片直接加缓冲液研磨的方式取代液氮研磨后超声提取的方式,并且在12000xg转速离心时以水平转子代替定角转子,纯化后内质网蛋白与总蛋白相比,内质网蛋白阳性标记GRP78和CNX,分别上升了约3.3倍和6.1倍,叶绿体阳性蛋白RCA和细胞核阳性蛋白Histone H3分别下降了约84.1%和74.4%。本发明首次建立一套适用于植物叶片内质网蛋白提取纯化的有效体系,对于其他植物叶片构建内质网蛋白提取纯化体系具有参考意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 植物 叶片 提取 纯化 内质网 及其 蛋白 有效 方法 | ||
【主权项】:
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