[发明专利]一种通过优化供体DNA模板来提高基因精确替换效率的方法有效
申请号: | 201911411090.2 | 申请日: | 2019-12-31 |
公开(公告)号: | CN111019969B | 公开(公告)日: | 2023-06-06 |
发明(设计)人: | 杨进孝;赵久然;宋伟;宋金岭;冯峰 | 申请(专利权)人: | 北京市农林科学院 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/54;A01H5/00;A01H6/46 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100097 北京市海淀区曙*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种通过优化供体DNA模板来提高基因精确替换效率的方法。该方法包括如下步骤:将esgRNA、Cas9切刻酶、筛选剂抗性蛋白、供体DNA导入植物中;esgRNA靶向DNA片段甲靶点序列;DNA片段甲靶点序列位于植物基因组中的非转录链上;供体DNA的转录链依次由DNA片段甲靶点序列、DNA片段乙和DNA片段甲靶点序列组成;DNA片段乙为将DNA片段甲突变后得到的DNA分子;在esgRNA引导下,Cas9切刻酶在植物基因组的转录链上产生一个单链切刻,在供体DNA的非转录链上产生两个单链切刻,通过植物体内的修复机制将植物基因组中DNA片段甲替换为DNA片段乙,实现植物基因替换。 | ||
搜索关键词: | 一种 通过 优化 供体 dna 模板 提高 基因 精确 替换 效率 方法 | ||
【主权项】:
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