[发明专利]在减少的扩增时间下使用巢式重叠引物的指数基数-3核酸扩增

摘要

提供高效核酸扩增的方法和引物组组合物。在一些实施方案中，与常规PCR相比，这允许实现每个扩增循环的扩增产物的3倍或更高的增加，并因此实现增加的灵敏度和速度。该方法基于使用一组巢式引物，外引物包含经修饰的碱基，例如，2‑氨基腺嘌呤或2‑硫代胸腺嘧啶，以及内引物包含单链靶标结合区和双链区，所述双链区分包含不与靶标互补的瓣状序列和与外引物互补的区。与在不存在经修饰的碱基的情况下观察到的那些PCR循环时间相比，所述修饰的碱基通过允许外引物结合靶标而改善了PCR循环时间。所述方法和组合物还可以分别使用并包含具有作为内引物结构的第三中间引物。