[发明专利]使用利用单一的AAV载体的基因组编辑的基因治疗

摘要

一种载体，其为用于向细胞内的核酸中插入希望的核酸的腺相关病毒(AAV)载体，前述细胞内的核酸在从5’末端到3’末端的方向上依次包含由第1核苷酸序列组成的区域及由第2核苷酸序列组成的区域，前述载体包含：第1gRNA靶序列、由第1核苷酸序列组成的区域、前述希望的核酸、由第2核苷酸序列组成的区域、第2gRNA靶序列、细胞特异性启动子、编码Cas9核酸酶的序列、RNA聚合酶III启动子、编码识别前述第1gRNA靶序列的第1gRNA的序列、及编码识别前述第2gRNA靶序列的第2gRNA的序列，前述载体在前述Cas9核酸酶作用下产生包含由第1核苷酸序列组成的区域、前述希望的核酸、及由前述第2核苷酸序列组成的区域的核酸片段，前述细胞内的核酸中的第1核苷酸序列与前述载体中的第1核苷酸序列通过微同源介导性结合而连接，前述细胞内的核酸中的第2核苷酸序列与前述载体中的第2核苷酸序列通过微同源介导性结合而连接，由此前述希望的核酸被插入前述细胞内的核酸中的由前述第1核苷酸序列组成的区域和由前述第2核苷酸序列组成的区域之间。