[发明专利]使用位点特异性核酸酶优化核酸的体外分离

摘要

本发明涉及制备包含用于从样本中分离的靶区域的核酸分子的方法，所述方法包括以下步骤：使核酸分子的群体与第一2类V型Cas蛋白‑gRNA复合物以及保护剂分子接触，其中gRNA包含与核酸分子内的第一序列互补的向导段，其中所述第一序列毗邻所述靶区域，从而形成2类V型Cas蛋白‑gRNA‑核酸复合物；使核酸分子的群体与至少一种具有核酸外切酶活性的酶接触，在步骤a)中形成的2类V型Cas蛋白‑gRNA‑核酸复合物中回收所述包含靶区域的核酸分子，以及使步骤c)的核酸分子与进行性聚合酶接触，优选嗜温或嗜热聚合酶，甚至更优选为T4DNA聚合酶。