[发明专利]一种检测凋落物β-木糖苷酶活性的方法

摘要

本发明公开了一种检测凋落物β‑木糖苷酶活性的方法，涉及凋落物酶活性检测的技术领域。该方法包括以下步骤：1)在凋落物碎屑中加入培养缓冲液，低温孵育，离心收集滤液，进一步稀释得到待测酶液；并制备灭活酶液；2)制作MUB共轭木糖苷底物浓度与吸光值之间关系的标准曲线；3)将待测酶液和灭活酶液分别加入酶活力孔和阴性对照孔，再加入荧光共轭木糖苷工作液，避光震荡孵育，反应结束后加入终止液终止反应，在检测条件下，读取荧光值；4)根据标准曲线，运算β‑木糖苷酶比酶活。本发明对反应体系进行了优化，检测指标减少，反应酶液和试剂耗损少；灵敏度呈数量级提高；适用于酶含量较低的凋落物的β‑木糖苷酶活力测定。