[发明专利]一种肺癌细胞株突变文库及其构建方法有效

专利信息
申请号: 202010065207.2 申请日: 2020-01-20
公开(公告)号: CN111154804B 公开(公告)日: 2022-03-01
发明(设计)人: 常德;D·查尔斯;S·罗克什 申请(专利权)人: 中国人民解放军总医院第三医学中心
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C40B50/06;C40B40/02
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 邓宇
地址: 100039*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 一种肺癌细胞株突变文库及其构建方法,属于基因突变技术领域。本发明提供了一种肺癌细胞株突变文库的构建方法:1)用CAG‑tTA质粒转染人肺癌细胞株,获得稳定表达且受四环素调控的转录激活因子的Tet‑off细胞株;2)将基因搜寻载体和有效表达转座酶MPB的质粒,共转染步骤1)获得的Tet‑off细胞株,获得全基因组纯合细胞突变体;所述基因搜寻载体的转染剂量为500ng/105个细胞,所述有效表达转座酶MPB的质粒的转染剂量为125ng/105个细胞。本发明可用于肺癌相关基因的筛选。
搜索关键词: 一种 肺癌 细胞株 突变 文库 及其 构建 方法
【主权项】:
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