[发明专利]一种大型基因簇的无痕定点改造方法及其应用有效
| 申请号： | 202010147911.2 | 申请日： | 2020-03-05 |
| 公开（公告）号： | CN113355339B | 公开（公告）日： | 2023-01-24 |
| 发明（设计）人： | 王海龙;宋超逸;栾霁;符军;张友明 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/90;C12N15/65;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人： | 刘文容 |
| 地址： | 250199 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种大型基因簇的无痕定点改造方法及其应用。本发明中的无痕定点改造方法首先利用Redαβ线环重组将含有目标DNA‑正向筛选标记‑反向筛选标记组成的基因盒插入靶位点得到重组载体，其中正向筛选标记‑反向筛选标记两侧带有特异性限制酶切位点和末端同源臂；随后重组载体经特异性限制酶切线状化，暴露出末端同源臂；最后在核酸外切酶介导的体外退火作用下，线状DNA分子通过末端同源臂环化完成DNA的无痕修饰。本发明中的无痕定点改造方法可以高效的编辑生物合成途径，在大型聚酮基因簇中进行DNA插入、删除等无痕定点修饰，从而有目的的改变聚酮骨架结构或进行糖基修饰，为聚酮化合物生物合成途径的改造提供了便利。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大型 基因 定点 改造 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
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