[发明专利]一种热诱导的基因编辑系统CRISPR-Cas12b在陆地棉中的应用有效
申请号: | 202010179130.1 | 申请日: | 2020-03-15 |
公开(公告)号: | CN111378684B | 公开(公告)日: | 2023-06-27 |
发明(设计)人: | 金双侠;张献龙;王琼琼;王福秋;李波;丁宵 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/66;A01H5/00;A01H6/60 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人: | 张红兵 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种热诱导的基因编辑系统CRISPR‑Cas12b首次在陆地棉中的应用。对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ载体进行改造,以密码子优化合成的AaCas12b蛋白取代原Cas9蛋白,构建棉花中具有编辑能力的载体。选取GhCLA为目标基因验证载体在棉花中的应用。设计2个靶标,利用农杆菌介导的转化将Cas12b编辑系统导入棉花基因组,使用三种温度不同时间处理下胚轴,转基因植株进行相关测序,检测异源四倍体棉花基因组中的编辑效率和全基因组检测脱靶效应。本发明使用特定的温度和处理时间得到良好的编辑效率和特异性。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 基因 编辑 系统 crispr cas12b 陆地棉 中的 应用 | ||
【主权项】:
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