[发明专利]基于CRISPR/Cas9系统介导的DNA靶向捕获方法有效
申请号: | 202010239831.X | 申请日: | 2020-03-30 |
公开(公告)号: | CN111471745B | 公开(公告)日: | 2021-09-07 |
发明(设计)人: | 赵书红;付亮亮;李新云;谢胜松;周鹏;陈辉 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人: | 江丽丽 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas9系统介导的DNA靶向捕获方法,针对目标DNA区域的上下游分别设计一条sgRNA,在两条sgRNA序列的3'末端添加不同的捕获序列和一段与sgRNA反向互补的序列从而构成pegRNA,当pegRNA‑Cas9蛋白复合物靶向结合目标DNA时,通过pegRNA介导的定点插入,在目标DNA区域上下游分别插入不同的捕获序列,然后通过含捕获序列的引物进行PCR扩增,从DNA文库或全基因组中靶向富集并分离目标DNA,可直接用于后续的捕获测序。本发明提供的方法与其它富集方法相比,简单、快速、特异性强、灵敏度高,在DNA序列分析上有广阔的应用优势。 | ||
搜索关键词: | 基于 crispr cas9 系统 dna 靶向 捕获 方法 | ||
【主权项】:
暂无信息
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