[发明专利]一种将寡聚核苷酸逆转录成cDNA的方法及寡聚核苷酸检测方法有效

专利信息
申请号: 202010316713.4 申请日: 2020-04-21
公开(公告)号: CN111500676B 公开(公告)日: 2022-09-09
发明(设计)人: 秦少伟;赵利峰;李才林 申请(专利权)人: 桂林旅游学院
主分类号: C12Q1/6806 分类号: C12Q1/6806;C12Q1/6851;C12Q1/6869
代理公司: 北京冠榆知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11666 代理人: 王道川
地址: 541006 广西壮*** 国省代码: 广西;45
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摘要: 发明一种将寡聚核苷酸逆转录成cDNA的方法及寡聚核苷酸检测方法,包括如下步骤:(1)设计单链DNA,单链DNA的中间部分与目标寡聚核苷酸碱基互补;(2)根据目标寡聚核苷酸选择上游辅助RNA和下游辅助RNA,且上游辅助RNA的3’端含有羟基,下游辅助RNA的5’端含有单磷酸基团;单链DNA的两端分别与上游辅助RNA和下游辅助RNA碱基互补;(3)利用T4DNA连接酶将目标寡聚核苷酸两端分别与上游辅助RNA和下游辅助RNA连接起来;(4)将单链DNA消化掉,得到中间部分为目标寡聚核苷酸的待逆转录单链RNA;(5)在待逆转录单链RNA的3’端设计引物,将待逆转录单链RNA逆转录成cDNA。不仅能够检测10nt以上的核苷酸,特别是能够检测6‑10nt长的小片段核苷酸。
搜索关键词: 一种 将寡聚 核苷酸 逆转录 cdna 方法 检测
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