[发明专利]一种将寡聚核苷酸逆转录成cDNA的方法及寡聚核苷酸检测方法有效
申请号: | 202010316713.4 | 申请日: | 2020-04-21 |
公开(公告)号: | CN111500676B | 公开(公告)日: | 2022-09-09 |
发明(设计)人: | 秦少伟;赵利峰;李才林 | 申请(专利权)人: | 桂林旅游学院 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/6851;C12Q1/6869 |
代理公司: | 北京冠榆知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11666 | 代理人: | 王道川 |
地址: | 541006 广西壮*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明一种将寡聚核苷酸逆转录成cDNA的方法及寡聚核苷酸检测方法,包括如下步骤:(1)设计单链DNA,单链DNA的中间部分与目标寡聚核苷酸碱基互补;(2)根据目标寡聚核苷酸选择上游辅助RNA和下游辅助RNA,且上游辅助RNA的3’端含有羟基,下游辅助RNA的5’端含有单磷酸基团;单链DNA的两端分别与上游辅助RNA和下游辅助RNA碱基互补;(3)利用T4DNA连接酶将目标寡聚核苷酸两端分别与上游辅助RNA和下游辅助RNA连接起来;(4)将单链DNA消化掉,得到中间部分为目标寡聚核苷酸的待逆转录单链RNA;(5)在待逆转录单链RNA的3’端设计引物,将待逆转录单链RNA逆转录成cDNA。不仅能够检测10nt以上的核苷酸,特别是能够检测6‑10nt长的小片段核苷酸。 | ||
搜索关键词: | 一种 将寡聚 核苷酸 逆转录 cdna 方法 检测 | ||
【主权项】:
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