[发明专利]一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法有效
申请号: | 202010332050.5 | 申请日: | 2020-04-24 |
公开(公告)号: | CN111424118B | 公开(公告)日: | 2022-10-25 |
发明(设计)人: | 丁铭;钟静;李婷婷;赵丽玲 | 申请(专利权)人: | 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/94 |
代理公司: | 云南律翔知识产权代理事务所(普通合伙) 53219 | 代理人: | 谢乔良 |
地址: | 650224 云南省昆明市盘龙区*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了一种西番莲病毒病原多重复合PCR检测方法,包括以下步骤:提取样本总RNA;设计用于扩增西番莲中重要病毒病原黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒基因片段的特异性引物;在无RNA酶的PCR管中加入提取的西番莲植物总RNA样品1~3μg高温变性获得病毒RNA作为模板进行逆转录反应合成cDNA第一链;利用单管多重PCR扩增反应得到PCR扩增产物;将获得的PCR扩增产物进行2.0%琼脂糖凝胶电泳检测。本发明应用黄瓜花叶病毒、芜菁花叶病毒、西番莲果实木质化病毒、夜来香花叶病毒4种病毒特异引物可以同时在单PCR管中检测4种西番莲主要病毒,特异性、简便性、灵敏度和准确性较单一病毒或两种病毒检测有较大的优势。 | ||
搜索关键词: | 一种 西番莲 病毒 病原 多重 复合 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】:
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