[发明专利]一种等位特异性位点编辑方法有效
申请号: | 202010378134.2 | 申请日: | 2020-05-07 |
公开(公告)号: | CN111518839B | 公开(公告)日: | 2022-12-09 |
发明(设计)人: | 高绍荣;刘文强;李延鹤;翁雨藤;柏丹丹;陈嘉瑜;殷吉庆 | 申请(专利权)人: | 上海市第一妇婴保健院 |
主分类号: | C12N15/90 | 分类号: | C12N15/90;C12N9/22;A01K67/027 |
代理公司: | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人: | 巫蓓丽 |
地址: | 200040 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种等位特异性位点编辑方法,包括以下步骤:1)取MII期的卵母细胞分为两组,第一组对其进行Cas9 mRNA和靶向目的基因的sgRNA的显微注射,第二组不做任何处理;2)对两组MII卵母细胞同时进行体外受精;3)待胚胎大约发育到受精卵PN3‑4时期,利用原核互换的显微操作方法,将注射组受精卵的雌雄原核分别取出,然后将未处理组受精卵分为两组,一组去掉雌原核,一组去掉雄原核,再将注射组分别取出的雌雄原核各自融合到已经弃掉单原核的未处理组受精卵中;4)将操作后胚胎放入培养箱中等待其充分恢复从而组成一个新的重构胚胎。本发明实现了Cas9活性控制及单等位位点编辑,扩大了基因编辑的应用范围。 | ||
搜索关键词: | 一种 等位 特异性 编辑 方法 | ||
【主权项】:
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