[发明专利]一种用于合成生物学部件高效组装的试剂盒及其使用方法在审
申请号: | 202010574178.2 | 申请日: | 2020-06-22 |
公开(公告)号: | CN111748540A | 公开(公告)日: | 2020-10-09 |
发明(设计)人: | 苗志奇;徐美慧;张耀杰;唐克轩 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N9/00;C12N15/66;C12N15/53;C12N15/55;C12N15/113 |
代理公司: | 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 | 代理人: | 郑立 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于合成生物学部件高效组装的试剂盒及其使用方法,涉及合成生物学领域。试剂盒包括缓冲液、ATP、ⅡS核酸内切酶和T4DNA连接酶。本发明还提供该试剂盒的使用方法,即利用缓冲液、ATP和超纯水构建缓冲体系;加入T4DNA连接酶和ⅡS核酸内切酶,形成酶切连接体系;加入待组装部件和目标空载体,添加超纯水调整反应体系的体积;在PCR仪上进行热循环;PCR产物直接用于大肠杆菌转化,在筛选平板上选择白色抗性克隆,纯化质粒即可获得包含组装部件的目标重组载体。本发明从反应缓冲体系、ⅡS核酸内切酶活力以及部件与空载体的加入比例三方面入手进行优化,大幅度降低了合成生物学复杂通路的构建难度和成本。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 合成 生物学 部件 高效 组装 试剂盒 及其 使用方法 | ||
【主权项】:
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