[发明专利]应用HPV18间隔序列构建双顺反子表达质粒的方法有效
| 申请号： | 202010659734.6 | 申请日： | 2020-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN111944849B | 公开（公告）日： | 2023-09-15 |
| 发明（设计）人： | 何红鹏;张傲薇;王媛;李伟强;刘浩成;张同存;王楠;罗学刚;马文建;李中媛;宋亚囝;齐威;周飒 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N15/37;C12N15/65 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 韩晓梅 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种应用HPV18间隔序列构建双顺反子表达质粒的方法，步骤如下：⑴利用PCR方法扩增GFP编码序列；⑵利用PCR方法使pCMV‑Tag2B‑HPV18 E6质粒线性化；⑶利用同源重组法构建重组质粒；⑷转化大肠杆菌DH5α、挑单菌落、提取质粒；⑸后采用PCR验证质粒构建是否成功；⑹重组质粒pCMV‑Tag2B‑HPV18 E6‑GFP测序。本发明利用HPV18 E6和E7间隔序列构建了HPV18 E6和GFP(绿色荧光蛋白)的双顺反子表达质粒，并将此质粒转染哺乳动物细胞HEK293，实现了E6基因和GFP基因的共表达。 | ||
| 搜索关键词： | 应用 hpv18 间隔 序列 构建 顺反子 表达 质粒 方法 | ||
【主权项】：
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