[发明专利]一种筛选鉴定胁迫应答基因表达调控因子的方法有效
申请号: | 202010699515.0 | 申请日: | 2020-07-20 |
公开(公告)号: | CN111944874B | 公开(公告)日: | 2023-06-30 |
发明(设计)人: | 李先强;姜昕;方云;许玫英 | 申请(专利权)人: | 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心) |
主分类号: | C12Q1/66 | 分类号: | C12Q1/66;C12N15/65 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人: | 朱双;刘明星 |
地址: | 510070 广东省广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种筛选鉴定胁迫应答基因表达调控因子的方法。本发明开发了一种富集蛋白结合基因组DNA片段以构建用于识别能够应答环境胁迫的克隆的荧光素酶报告文库的方法。通过利用E.coil作为制备细胞裂解液和基因组DNA片段这二者的模型系统;将细胞裂解液与基因组DNA片段混合,富集了蛋白结合DNA片段并用膜旋转柱将其与未接合的DNA片段分离,该蛋白结合DNA片段用于制作荧光素酶报告文库,转化DH5α后,在Amp抗生素板上筛选抗性克隆;用丝裂霉素C或亚坤酸盐处理,都鉴定到了显示2倍荧光素酶诱导的克隆,进一步分析也证实了其相关性;说明本筛选鉴定方法高效、准确。 | ||
搜索关键词: | 一种 筛选 鉴定 胁迫 应答 基因 表达 调控 因子 方法 | ||
【主权项】:
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