[发明专利]一种L-天冬氨酸α-脱羧酶基因突变库的高通量筛选方法在审
申请号: | 202010716273.1 | 申请日: | 2020-07-23 |
公开(公告)号: | CN111809247A | 公开(公告)日: | 2020-10-23 |
发明(设计)人: | 章兆琪;郑文慧;黄勇开 | 申请(专利权)人: | 宁波酶赛生物工程有限公司 |
主分类号: | C40B30/08 | 分类号: | C40B30/08;C12N9/88;G01N21/31;G01N21/80 |
代理公司: | 浙江素豪律师事务所 33248 | 代理人: | 杨璇 |
地址: | 315000 浙江省宁波市鄞州区世纪大道北段*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种L‑天冬氨酸α‑脱羧酶基因突变库的高通量筛选方法,包括以下步骤:制备L‑天冬氨酸α‑脱羧酶基因突变库孔板;向L‑天冬氨酸α‑脱羧酶基因突变库孔板中加入破碎液,充分震荡,离心,取上清加入到深孔板中,并加入天冬氨酸溶液,摇床反应;取反应后的深孔板,先用乙腈灭活,离心,再取上清液到酶标检测板;然后向所述酶标检测板中加入pH指示剂,并放入酶标仪,在560nm~600nm波长下读取OD值,最后筛选出较高OD值对应的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶。该高通量筛选方法操作简便,实施准确,筛选速度快、效率高,而且成本较低;因此,特别适用于筛选出更多高活性的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶,因此也有利于酶科学技术的推广应用。 | ||
搜索关键词: | 一种 天冬氨酸 脱羧酶 基因突变 通量 筛选 方法 | ||
【主权项】:
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