[发明专利]一种用于DNA均相检测的CRISPR/Cas9分型PCR方法及其应用有效
申请号: | 202010727747.2 | 申请日: | 2020-07-23 |
公开(公告)号: | CN112029838B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 王进科;吴琳 | 申请(专利权)人: | 东南大学 |
主分类号: | C12Q1/686 | 分类号: | C12Q1/686;C12Q1/70;C12N15/113;C12R1/93 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 孙斌 |
地址: | 211102 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于DNA均相检测的CRISPR/Cas9分型PCR方法及其应用,该方法包括如下步骤:将全部反应组分加入一个PCR管中混合,混合物放置于荧光定量PCR仪上运行PCR程序,即可即时获得检测结果,期间无需再打开试管添加其他试剂或增设其他操作,检测结束后PCR反应管不开盖直接丢弃。本发明方法仅在当前PCR反应中增加了几个新组分,包括Cas9核酸酶和两个sgRNA和插入寡核苷酸,通过添加这些新的组分,消除了繁琐的引物设计。以单个通用引物代替传统引物,用于扩增所有靶DNA;本发明方法简便,检测快速,可以高特异性、高灵敏度地均相检测目标DNA,克服了PCR的局限性。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 dna 均相 检测 crispr cas9 pcr 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
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