[发明专利]基于CRISPR-Cas9构建基因编辑巨噬细胞的方法及构建的基因编辑巨噬细胞在审
| 申请号： | 202010864444.5 | 申请日： | 2020-08-25 |
| 公开（公告）号： | CN111944762A | 公开（公告）日： | 2020-11-17 |
| 发明（设计）人： | 周丽婷;叶颖;原海波;吴淑燕 | 申请（专利权）人： | 苏州大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N5/0786;C12N15/85 |
| 代理公司： | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人： | 王玉仙 |
| 地址： | 215000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9构建基因编辑巨噬细胞的方法及构建的基因编辑巨噬细胞，属于基因工程技术领域。本发明采用将Cas9质粒与sgRNA分两步电转的方法，一方面通过减少外源基因数量提高转染效率，另一方面构建成功的稳定表达Cas9的巨噬细胞可作为工具细胞进行其他基因的编辑，为后续巨噬细胞的基因编辑奠定基础。此外，本发明的sgRNA是在内含子上进行设计，可将整个外显子切除致使几百甚至上千个碱基丢失，用PCR扩增快速初筛，3h左右即可获得结果，在难以转染的巨噬细胞中大大提高了筛查效率。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 crispr cas9 构建 基因 编辑 巨噬细胞 方法 | ||
【主权项】：
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