[发明专利]一种基于全长小亚基核糖体RNA的反转录来分析微生物群落结构的方法有效
申请号: | 202010881408.X | 申请日: | 2020-08-27 |
公开(公告)号: | CN111996245B | 公开(公告)日: | 2022-12-16 |
发明(设计)人: | 全哲学;张汝毅;阎永伟 | 申请(专利权)人: | 复旦大学 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C12Q1/04 |
代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 刘燕武 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种基于全长小亚基核糖体RNA的反转录来分析微生物群落结构的方法,包括以下步骤:(1)快速提取样品中的总RNA;(2)在RNA的5’端加第一接头序列;(3)在能够覆盖真核和原核生物的通用反向引物的5’端加第二接头序列,用于反转录小亚基核糖体RNA;(4)在反转录产物中筛选核糖体SSU cDNA;(5)进行PCR扩增,获得双链全长核糖体SSU cDNA,对扩增产物进行测序,并提取出全长SSU rRNA序列;(6)根据所得全长SSU rRNA序列确定准确的分类信息,获得精细的微生物群落结构。与现有技术相比,本发明不使用“通用”正向引物,减少PCR过程产生的偏差,能够得到常规“通用”引物PCR扩增遗漏的微生物,并同时分析细菌、古生菌和真核微生物的整体群落结构等。 | ||
搜索关键词: | 一种 基于 全长 小亚基 核糖体 rna 转录 分析 微生物 群落 结构 方法 | ||
【主权项】:
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