[发明专利]一种单链核酸分子高通量测序文库的构建方法及其应用有效

专利信息
申请号: 202010949803.7 申请日: 2020-09-10
公开(公告)号: CN111979583B 公开(公告)日: 2023-09-12
发明(设计)人: 张腾龙;杨春燕;梁占超;商宇红;师雅宁;段小红;王东亮 申请(专利权)人: 杭州求臻医学检验实验室有限公司
主分类号: C40B50/06 分类号: C40B50/06;C12Q1/6869
代理公司: 重庆百润洪知识产权代理有限公司 50219 代理人: 姚琼斯
地址: 浙江省杭州市萧山区萧山经济技术*** 国省代码: 暂无信息
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摘要: 发明涉及生物测序领域,特别涉及一种单链核酸分子高通量测序文库的构建方法及其应用;包括以下步骤:从样品细胞中获取单链核酸;采用片段化试剂对长链的单链核酸样本片段化;在片段化单链核酸的3'末端加上基团A;加入5'端被基团B修饰且含有UMI分子标签的单链接头和盐离子缓冲液,在室温条件下,3'修饰基团A的片段化单链核酸与5'端修饰基团B单链接头发生加成反应且连接在一起;加入单向延伸引物1、单向延伸引物2和单链延伸试剂,用于由单链核酸变成双链核酸;加入测序引物和PCR混合液进行扩增,扩增产物即为测序文库。本发明的方法不仅适用于RNA样品,还适用于ssDNA,操作步骤简单,具有时间短、成本低、效率高的优势。
搜索关键词: 一种 核酸 分子 通量 序文 构建 方法 及其 应用
【主权项】:
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