[发明专利]二甲基异茨醇单克隆抗体的制备及其酶联免疫吸附分析方法

摘要

本发明涉及一种二甲基异茨醇单克隆抗体的制备及其酶联免疫吸附分析方法，属于免疫化学及分析生物技术领域。本发明提供二甲基异茨醇单克隆抗体的制备方法，该方法包括以下步骤：先合成二甲基异茨醇修饰物，再制备2‑MIB修饰物‑BSA和2‑MIB修饰物‑OVA，再利用2‑MIB修饰物‑BSA和2‑MIB修饰物‑OVA制备二甲基异茨醇单克隆抗体。本发明是以分子结构与2‑MIB相似的樟脑作为半抗原修饰的起始物，将樟脑修饰后合成2‑MIB的修饰物，使修饰物不仅保留了2‑MIB完整的分子结构，而且引入带有端基为羧基的连接臂；通过格氏试剂进攻羰基，接着将双键氧化生成羧基，最后利用衍生物的羧基与载体蛋白相连，即制备成免疫原和包被原，降低了生产成本。同时以杂交瘤技术成功制备抗2‑MIB的单克隆抗体；建立了检测2‑MIB的间接竞争ELISA，灵敏度（IC50值）为52.61 ng/mL。