[发明专利]细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95组成型表达载体的构建方法在审
申请号: | 202011050126.1 | 申请日: | 2020-09-29 |
公开(公告)号: | CN112250748A | 公开(公告)日: | 2021-01-22 |
发明(设计)人: | 贾万忠;闫鸿斌;李立;郭爱民;李建秋;李文静;李文卉;李乐;张林生;张念章;付宝权 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C12N15/81;C12N15/66;C12N1/19;C12R1/84 |
代理公司: | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人: | 王芊雨 |
地址: | 730010 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明提供一种细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95基因组成型表达载体,且提供含有该表达载体的毕赤酵母基因工程菌。申请人成功在毕赤酵母组成型表达系统中实现了EG95蛋白的分泌性表达,经三角瓶摇床表达的蛋白浓度达到0.5g/L,目的蛋白纯度达到90%以上。经Westernblotting试验证实,表达的重组蛋白与现有羊棘球蚴病EG95亚单位疫苗免疫阳性血清具有良好的反应原性和特异性(与其他重组蛋白抗体无反应)。本发明从构建的p‑GAPZαA‑Eg95重组质粒转化毕赤酵母SMD1168中筛选出可以高效稳定地分泌表达EG95重组蛋白的工程菌,且不需使用诱导剂,显著降低了生产周期、生产成本和生产的复杂性。 | ||
搜索关键词: | 细粒 棘球蚴 免疫原性 蛋白 eg95 组成 表达 载体 构建 方法 | ||
【主权项】:
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