[发明专利]细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95组成型表达载体的构建方法在审

专利信息
申请号: 202011050126.1 申请日: 2020-09-29
公开(公告)号: CN112250748A 公开(公告)日: 2021-01-22
发明(设计)人: 贾万忠;闫鸿斌;李立;郭爱民;李建秋;李文静;李文卉;李乐;张林生;张念章;付宝权 申请(专利权)人: 中国农业科学院兰州兽医研究所
主分类号: C07K14/435 分类号: C07K14/435;C12N15/81;C12N15/66;C12N1/19;C12R1/84
代理公司: 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 代理人: 王芊雨
地址: 730010 甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要: 发明提供一种细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95基因组成型表达载体,且提供含有该表达载体的毕赤酵母基因工程菌。申请人成功在毕赤酵母组成型表达系统中实现了EG95蛋白的分泌性表达,经三角瓶摇床表达的蛋白浓度达到0.5g/L,目的蛋白纯度达到90%以上。经Westernblotting试验证实,表达的重组蛋白与现有羊棘球蚴病EG95亚单位疫苗免疫阳性血清具有良好的反应原性和特异性(与其他重组蛋白抗体无反应)。本发明从构建的p‑GAPZαA‑Eg95重组质粒转化毕赤酵母SMD1168中筛选出可以高效稳定地分泌表达EG95重组蛋白的工程菌,且不需使用诱导剂,显著降低了生产周期、生产成本和生产的复杂性。
搜索关键词: 细粒 棘球蚴 免疫原性 蛋白 eg95 组成 表达 载体 构建 方法
【主权项】:
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