[发明专利]枯草芽孢杆菌表达系统及其生产α-L-AFs的方法在审
申请号: | 202011143233.9 | 申请日: | 2020-10-23 |
公开(公告)号: | CN112226451A | 公开(公告)日: | 2021-01-15 |
发明(设计)人: | 孙俊松;纪明华;段海燕;刘云辉;史吉平 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海高等研究院 |
主分类号: | C12N15/75 | 分类号: | C12N15/75;C12N15/64;C12N9/24;C12N15/56 |
代理公司: | 上海硕力知识产权代理事务所(普通合伙) 31251 | 代理人: | 郭桂峰 |
地址: | 201210 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌表达系统及其生产α‑L‑AFs的方法。通过在枯草芽孢杆菌基因组的aprE位点插入木糖诱导的T7 RNA聚合酶表达系统,建立所述枯草芽孢杆菌表达系统。利用枯草芽孢杆菌表达系统生产α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶的方法为:合成序列如SEQ ID NO:2所示的质粒pMK4‑T7,在质粒pMK4‑T7中插入α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶的编码基因,得到表达质粒pMK4‑T7‑arbf;将表达质粒pMK4‑T7‑arbf转化至权利要求1所述的枯草芽孢杆菌表达系统得到枯草芽孢杆菌T7‑arbf;所述枯草芽孢杆菌T7‑arbf进行发酵培养分泌生产α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶。本发明能够以廉价的麸皮为诱导物高效表达蛋白;在发酵实验中,α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶的最高酶活可以达到194.8±4.1U/mL。 | ||
搜索关键词: | 枯草 芽孢 杆菌 表达 系统 及其 生产 afs 方法 | ||
【主权项】:
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