[发明专利]一种利用大肠杆菌高效表达并分泌人生长激素的方法在审
申请号: | 202011161350.8 | 申请日: | 2020-10-27 |
公开(公告)号: | CN112266924A | 公开(公告)日: | 2021-01-26 |
发明(设计)人: | 陈剑清;王可盈;盖其静 | 申请(专利权)人: | 浙江理工大学绍兴生物医药研究院有限公司;浙江理工大学;浙江清肽生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/62 | 分类号: | C12N15/62;C12N15/70;C12N15/67;C12N1/21;C07K14/61;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/18;C12R1/19 |
代理公司: | 浙江纳祺律师事务所 33257 | 代理人: | 郑满玉 |
地址: | 312000 浙江省绍兴市上虞区滨海新*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开的是一种能够利用大肠杆菌高效表达并分泌人生长激素的方法,经过双酶切后插入到载体pET28a(+)相应的酶切位点上得到pET28a‑ST Ⅱ‑hGH重组载体,工程菌:含有pET28a‑ST Ⅱ‑hGH重组表达载体的大肠杆菌,表达人生长激素蛋白:将含有pET28a‑ST Ⅱ‑hGH重组表达载体的大肠杆菌,培养、诱导,收集表达了人生长激素蛋白的菌体;纯化重组人生长激素:菌体破碎、超滤、层析,加入核糖体结合位点避免使用昂贵限制性内切酶Nco Ⅰ,去除了pET28a(+)上多余序列,利用了载体原来的T7启动子来启动目的基因表达,常规载体实现人生长激素在大肠杆菌中的高效分泌表达,提高了生长激素的表达量。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 大肠杆菌 高效 表达 分泌 人生 激素 方法 | ||
【主权项】:
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