[发明专利]一种重组限制性内切酶在大肠杆菌中的生产方法在审

专利信息
申请号: 202011210217.7 申请日: 2020-11-03
公开(公告)号: CN112359054A 公开(公告)日: 2021-02-12
发明(设计)人: 雍金贵;雍德祥;李森;张伦 申请(专利权)人: 安徽环球基因科技有限公司
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/62;C12N9/22
代理公司: 合肥正则元起专利代理事务所(普通合伙) 34160 代理人: 周卫
地址: 239000 *** 国省代码: 安徽;34
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摘要: 发明公开了一种重组限制性内切酶在大肠杆菌中的生产方法,本发明通过重组方式将带有SUMO标签的Sac I限制性内切酶与甲基化酶克隆到含His标签的pCreat Duet共表达载体中,在低温条件下表达量达到25%,通过Ni柱亲和层析、Superdex200凝胶过滤层析得到高活力的重组Sac I限制性内切酶,比活较商业化酶更高,通过Superdex200分子筛层析对蛋白进行提纯,经纯化工艺摸索及条件优化,整个纯化过程仅需6‑7h,极大简化了纯化过程及时间,从而保证了酶活性,有利于酶产量的提高,为研发及生产其他Ⅱ型限制性内切酶奠定了基础。
搜索关键词: 一种 重组 限制性 内切酶 大肠杆菌 中的 生产 方法
【主权项】:
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