[发明专利]一种快速鉴定shRNA有效性的方法在审
申请号: | 202011227504.9 | 申请日: | 2020-11-06 |
公开(公告)号: | CN112301061A | 公开(公告)日: | 2021-02-02 |
发明(设计)人: | 张昊星;李延鹏;李嘉恒;吴精博;应明 | 申请(专利权)人: | 深圳大学 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N15/65;C12Q1/68;G01N33/68 |
代理公司: | 成都方圆聿联专利代理事务所(普通合伙) 51241 | 代理人: | 李鹏 |
地址: | 518055 广东省深圳市南山区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速鉴定shRNA有效性的方法,包括以下步骤:(1)设计并合成多条候选shRNA作为候选功能性shRNA;(2)构建基于慢病毒载体的PLKO.1‑shRNA重组载体;(3)在HEK293/HEK293T细胞中,利用细胞瞬时转染方法,共转染入细胞;(4)转染完成6‑8小时后,给细胞更换新鲜培养基并继续培养24‑48小时;(5)收取细胞并裂解细胞,提取总蛋白;(6)Western Blot检测目的蛋白表达并通过比较对照组与处理组中目的蛋白表达差异鉴定候选shRNA的有效性。本发明节省时间成本约50%,整体实验工作量降低约70%,人工成本也显著大幅度降低。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 鉴定 shrna 有效性 方法 | ||
【主权项】:
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